多肽溶解与保存_资源共享-上海强耀生物科技有限公司

若不知如何恰当地溶解您的样品，尤其是如何溶解疏水性的多肽，往往会给您的实验开展带来困难。测定多肽最佳溶解条件，对样品的消耗是不可避免的，若消耗过多，可能造成剩余的关键多肽样品不足以完成您的后续实验。

强耀生物提供溶解测试服务，可以帮您更加从容地应对疏水性多肽。您将无需再通过额外实验估测样品的溶解性质，由我们来为您提供完整的、量身定制的多肽溶解特性报告，专门为您解决多肽溶解性质的疑问。

合适的多肽溶解多肽分析实验成功的重要因素。多肽溶解不当或溶解不充分会导致多肽浓度计算不准确,并可能会引起实验误差，或者导致实验失败。

建议先用少量肽来试验最适溶解方法，只有当多肽完全溶解后，才能加入溶液并将之稀释至最终浓度。即先溶解，后加入缓冲液。注意,总是将多肽加入到适当溶剂中搅拌，而不能采用其它方式。

冻干多肽的保存

所有标明"保持冻干"的产物,都必须保存在冰冻条件下，最好-20℃，若保存在-80℃以下,大多数肽可维持几年的活性。

当使用冰冻产品时,开盖之前,瓶或试管应在装有新鲜干燥剂的干燥箱内升至室温。对于保存于-20°C的产品,这个过程需要一小时或更长,随包装大小而异。否则,当瓶打开时,水气进入导致多肽凝缩而降低其稳定性。一旦打开,应迅速称量完毕,并立即密闭以免潮解,尤其亲水肽更应注意。

多肽溶液的保存

多肽溶液比干粉的稳定性差很多,为了得到最好结果,遵循下列原则:

反复冻融有损于肽的活性,所以建议分装成小包装保存。需要多少解冻多少,用后剩余者弃掉。
溶于PH5-7无菌的缓冲液中,贮存于-20℃。
包含Cys、Met、Trp、Glu、Asp的多肽易于氧化,因此须保存在无氧化剂的环境中。
由于细菌能降解多肽,因此贮存前必须过滤除菌。

多肽合成的基本原理是什么？

多肽固相合成法是多肽合成化学的一个重大的突破。它的最大特点是不必纯化中间产物，合成过程可以连续进行，进而为多肽合成的自动化奠定了基础。目前全自动多肽合成，基本都是固相合成。

多肽如何溶解以达到最大溶解浓度？

溶解多肽是非常复杂的事情，一般很难一下子确定合适的溶剂。通常是先取一点试验，在没有确定合适的溶剂前千万不要全部溶解。对于常规溶解，有如下几条建议：（1）超声波可以增加多肽的溶解性；（2）10％的乙酸有助于溶解碱性多肽；（3）10％的碳酸氢铵有助于溶解酸性多肽；对于在水溶液中溶解度极低的多肽，应先尝试用有机溶剂（例如DMSO,异丙醇，甲醇，乙腈）溶解，一旦多肽全部溶解，逐渐加水稀释到指定浓度。

如何定义多肽的纯度？

多肽的纯度通常是通过HPLC，用每分钟1%的标准乙腈梯度来检测决定的。合成过程中，氨基酸之间的交联效率不是总能达到100%，因而产生一系列的氨基酸缺失的杂质。大多数这样的氨基酸缺失的杂质在纯化过程中都被去掉了，但有少数的杂质其色谱表现与目标多肽很相近。这些氨基酸缺失的杂质肽留在了多肽样品中就构成了余下的几个百分点。

如何对合成的多肽进行质检？

通常以质谱法测定肽的分子量来确定产品是否正确，MS检测结果还可显示大部份的主要杂质。如果必要，还可提供肽净含量检测，如氨基酸分析或元素分析。这些方法可以证实多肽的氨基酸组成，他们均可作为多肽确认的补充方法。

为什么有些多肽的合成产率或纯度会比较低?

多肽合成与引子合成有比较大的区别，不能合成的引子很少，但是不能合成的多肽经常有。如Val,Ile,Tyr,Phe,Trp,Leu,Gln,和Thr这些氨基酸比邻或重复时，多肽链在合成过程中不能完全舒展溶解，合成效率下降。

做免疫用的多肽多长合适？

一般约10-15个氨基酸，当然长一些免疫效果好一些，不过合成费用也会增加。MAP多肽则希望长度在15aa以上，效果较好。另外，10aa以下的多肽免疫效果比较差。

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